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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
【鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒詳細(xì)說(shuō)明】
本試劑盒僅供研究使用
檢測(cè)范圍:歡迎或或索取原版說(shuō)明書(shū)
zui低檢測(cè)限:歡迎或或索取原版說(shuō)明書(shū),歡迎選購(gòu)!
有效期:6個(gè)月
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
說(shuō)明
1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不*之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理: 用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或者標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗體、HRP-標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物顯色。底物在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色, 并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)蛋白呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在(450nm)波長(zhǎng)下測(cè)定測(cè)定O.D.值(吸光度),計(jì)算樣品濃度。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(建議參考儀器使用說(shuō)明提前預(yù)熱)
2. 微量加液器及吸頭,EP 管
3. 蒸餾水或去離子水,全新濾紙 標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過(guò)夜后于 1000 x g 離心 20 分鐘,取上清即可
檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用 EDTA 或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后 30 分鐘內(nèi)于 2 - 8° C 1000 x g 離心 15
分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請(qǐng) 1000 x g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本
放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:以上標(biāo)本置 4℃保存應(yīng)小于 1 周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過(guò) 1 個(gè)月,-80℃
不應(yīng)超過(guò) 2 個(gè)月;標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
樣本處理:血清或血漿標(biāo)本推薦稀釋 10 倍,如:稀釋 10 倍,取 100uL 血清或血漿加入 900uL
樣品稀釋液。建議各實(shí)驗(yàn)室在操作前行預(yù)實(shí)驗(yàn)以建立*稀釋倍數(shù)。
試劑準(zhǔn)備不當(dāng)可能影響酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定ELISA結(jié)果
在實(shí)驗(yàn)室,對(duì)試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來(lái)即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問(wèn)題,其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。
因此,在ELISA測(cè)定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是,在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20min以上后,再進(jìn)行測(cè)定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度,以滿(mǎn)足測(cè)定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對(duì)所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。
此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時(shí),則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制。
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