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血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法
時(shí)間：2012/6/20 瀏覽次數(shù)：2241
血漿游離血紅蛋白測(cè)定實(shí)驗(yàn)中,介紹實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以及注意事項(xiàng).
實(shí)驗(yàn)原理
血紅蛋白具有類過(guò)氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色.根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測(cè)出其含量.
實(shí)驗(yàn)方法
材料：
1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2．1%H2O2
3．10%醋酸溶液
4．分光光度計(jì)
方法：
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿.
2．按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長(zhǎng)為530nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定測(cè)定管的吸光度.
血紅蛋白具有類過(guò)氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色.根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測(cè)出其含量.
實(shí)驗(yàn)方法
材料：
1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2．1%H2O2
3．10%醋酸溶液
4．分光光度計(jì)
方法：
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿.
2．按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長(zhǎng)為530nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定測(cè)定管的吸光度.
3.計(jì)算公式
血漿游離Hb（mg/L）=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
參考范圍：0-40mg/L
注意事項(xiàng)
1.一切容器避免血紅蛋白污染；
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測(cè)血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血；
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測(cè)時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染；
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確.
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