在ELISA實(shí)驗(yàn)中，引起酶免反應(yīng)顯色淡、靈敏度偏低有很多種因素，上海勁馬生物給大家介紹幾種可能的較常見的原因，注意收藏哦！

1. 試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長，溫度太高；要求運(yùn)輸時(shí)置于保溫箱內(nèi)運(yùn)輸，并放足夠數(shù)量的冰塊，盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間。

2. 試劑盒超過有效期；建議不要使用超過效期的試劑盒。

3. 試劑、樣品使用前未能平衡；建議使用前于室溫平衡30分鐘左右。

4. 試劑開啟時(shí)間過長，長菌；建議試劑開啟后應(yīng)該于半個(gè)月內(nèi)用完。

5. 移液器吸量不足，移液抽吸排放太快，吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔。建議使用一次性的吸頭。

6. 恒溫箱溫度不足37℃ （或水浴鍋溫度不足37℃）；建議孵育反應(yīng)期間應(yīng)該控制好溫度。

7. 孵育反應(yīng)時(shí)間不足；建議應(yīng)準(zhǔn)確記時(shí)。

8. 洗滌時(shí)沖擊力太大，洗滌液浸泡時(shí)間太長，洗滌次數(shù)增加。建議減少洗滌沖擊力，按說明書要求的時(shí)間，準(zhǔn)確記錄洗滌時(shí)間。

9. 顯色劑滴加量不足或順序顛倒，或混合后加入；建議應(yīng)該先加顯色劑A，后加顯色劑B，不可將A、B液混合后加入。

10. 顯色劑反應(yīng)時(shí)間不足；建議準(zhǔn)確記時(shí)。

11. 蒸餾水水質(zhì)有問題；建議檢查蒸餾水。

12. 樣品用疊氮鈉防腐，抑制了酶的反應(yīng)；建議不能加疊氮鈉防腐。

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