流式胞內(nèi)染色步驟

（使用FIX & PERM固定破膜）

制備好細(xì)胞懸液，取100ul

（全血樣本：人100ul，小鼠30~50ul）

染表面抗體，室溫避光孵育15min，不用洗滌

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加入FIX&PERM Reagent A 100ul室溫孵育15min

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加入3ml流式染色緩沖液（Flow Cytometry Staining Buffer）

300g 離心5min 棄上清收集細(xì)胞

液體盡量倒干凈，不要?dú)埩?/span>

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渦旋混勻沉淀，加入FIX&PERM Reagent B

100ul和胞內(nèi)抗體

（同型對(duì)照管加入同等劑量的抗體）

混勻，室溫避光孵育20min

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加入3ml流式染色緩沖液，300g離心5min棄上清收集細(xì)胞

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用0.5ml 流式染色緩沖液重懸后立即上機(jī)。

或者加入0.5ml 0.1~4%多聚甲醛避光4℃保存24小時(shí)內(nèi)上機(jī)分析