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技術(shù)解析:ELISA試劑盒的顯色弱問題

更新時(shí)間:2016-07-12 瀏覽次數(shù):1587

        上周,我公司技術(shù)員根據(jù)自身經(jīng)驗(yàn)總結(jié)了一篇ELISA實(shí)驗(yàn)心得及操作技巧,發(fā)布出后得到了業(yè)內(nèi)人士的高度關(guān)注。本周就ELISA試劑盒的顯色弱問題我司的ELISA咨詢顧問給出了具體分析

        顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時(shí)間過短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過長(zhǎng),空白增高或者非特異性顯色增加。

ELISA顯色弱的可能原因

對(duì)應(yīng)的解決方法

超過有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào)

檢查產(chǎn)品的有效期

加入試劑的體積和時(shí)間有誤

確定所使用的每一個(gè)試劑的體積正確的和加入的時(shí)間是適當(dāng)?shù)?/span>

試劑、樣品用前未能平衡

用前試劑、樣品置室溫平衡10分鐘左右

縮短孵育時(shí)間能使實(shí)驗(yàn)的信號(hào)變?nèi)?/span>

檢查孵育的時(shí)間

在溫度變化的環(huán)境內(nèi)孵育酶標(biāo)板

確定孵育的溫度,應(yīng)避免溫度的變化

使用了被污染的試劑

檢查試劑是否被污染

標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本制備方法不規(guī)范

檢查標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本的制備,標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按說明書進(jìn)行復(fù)溶和稀釋。低溫貯存的標(biāo)本避免反復(fù)凍融,嚴(yán)禁使用溶血標(biāo)本。樣品用NaN3防腐,抑制了酶的反應(yīng)

顯色底物制備不規(guī)范

檢查底物的制備,如體積是否正確,混合是否恰當(dāng)充分

檢測(cè)時(shí)間不當(dāng)

是否在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)檢測(cè)

儀器設(shè)定不正確,濾光片不匹配

儀器是否設(shè)定正確,濾光片的使用等

針對(duì)以上內(nèi)容,如有不太清楚的地方,或是想要咨詢了解更多相關(guān)ELISA的技術(shù)信息,您可以通過在線咨詢、留言、等方式我司業(yè)務(wù)員。無論合作成功與否,我公司都將以zui真摯、zui熱情的服務(wù)面對(duì)您。

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