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13817140470更新時(shí)間:2015-01-19 瀏覽次數(shù):2470
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以下何蘇木精-伊紅染色法概要,蘇木精-伊紅染色法使用目的。蘇木精-伊紅染色法的注意事項(xiàng)及操作步驟進(jìn)行了詳細(xì)的解答。歡迎大家咨詢閱讀
一、HE染色簡介
蘇木精-伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中zui基本、使用zui廣泛的技術(shù)方法。
二、HE染色目的
病理學(xué)的所有切片,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,將其顯示出來,使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠*的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出許多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供可靠的依據(jù),因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),方能提高。如果染色不好,切片染色一團(tuán)糟,紅藍(lán)不分,結(jié)構(gòu)不清,層次不明,影響了鏡下的觀察,直接影響了臨床診斷,染色結(jié)果的好壞直接關(guān)系到診斷的準(zhǔn)確性。
三、HE染色注意事項(xiàng)
標(biāo)本無論大小離體后均應(yīng)立即固定。大標(biāo)本還要按1cm間距剖開,加足固定液。固定液的量一般為標(biāo)本體積的10倍。固定液的種類較多,適合常規(guī)HE切片的固定液10%福爾馬林。固定時(shí)間應(yīng)大于8小時(shí),之后再取材。取材后再用95%酒精(Alcohol)85ml+冰醋酸(Acidaceti) 5ml+福爾馬林 (Formalin) 10ml ( 簡稱AAF 液) 補(bǔ)充固定1~2 小時(shí)。組織固定必須*以免影響脫水、切片、染色和鏡檢。取材的刀剪要鋒利,避免在取材時(shí)用力夾、鋸、壓使組織變形。組織大小一般為1.5cm×1.5cm,厚薄在0.2~0.3cm,細(xì)胞豐富的組織如淋巴結(jié)要小于0.2cm。形狀要規(guī)則平整,故新鮮標(biāo)本不宜立即取材。如遇到骨或鈣化組織需脫鈣處理。脫鈣后一定要除酸( 將組織放入2%氫氧化鈉溶液中10分鐘,流水沖洗10分鐘即可)。
四、操作步驟
以石蠟切片為例,HE染色石蠟切片制作的基本過程
1、取材與固定
2、脫水透明
3、浸蠟包埋
4、切片與貼片
5、脫蠟染色
五、染色結(jié)果細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。
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