許多科研愛好者們在做ELISA試劑盒實驗時總會碰到各種各樣的問題，那么為了避免問題再次困擾到您的實驗，上海勁馬今天要為您介紹的是：ELISA試劑盒基礎(chǔ)知識問答普及篇。
問題：ELISA加樣時如何防錯？
解決方案：
（1）用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這樣，加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。
（2）可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別
（3）在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，可以區(qū)分 
問題：如何正確使用酶結(jié)合物？
解決方案：
1.酶結(jié)合物的稀釋液 
在稀釋液中常加入高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)（例如1%BSA或5%脫脂奶粉），通過競爭抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸 附。一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20（0.05%的濃度較為適宜）。 
2.正確稀釋酶結(jié)合物 
酶 結(jié)合物的合適工作濃度需要通過預(yù)實驗來確定，濃度過高易導(dǎo)致本底偏高，濃度過低則會導(dǎo)致陽性信號的減弱。 
酶結(jié)合物在使用前稀釋，稀釋后的酶 結(jié)合物不宜長期保存，因為低濃度的酶結(jié)合物極易失活。 
問題：血清如何避免沉淀物的產(chǎn)生？
解決方案：
1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法（-2O。C至4。C至室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如-20。C至37。C），實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生
3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活，請遵守56。C，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。 [5]血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。
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