上海勁馬何于昨日親臨公司實驗室，與我司科研人員共同進行人α乳清蛋白ELISA試劑盒實驗，實驗結束后何就實驗中如何降低ELISA背景的問題闡述了自己的觀點和看法：

洗滌很重要
洗滌步驟看似很無聊，其實很重要，因為如果未結合的材料（如非特異結合的抗體或檢測試劑）殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結合反應。如果背景過高，可以嘗試增加洗滌次數。

封閉更關鍵
封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也希望抗體只與目的蛋白結合吧。如果您的背景過高，懷疑封閉不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當延長封閉時間。
如果您一直被背景問題所困擾，那么也許您該花些時間來優(yōu)化封閉液。這可能需要時間，但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測試劑。好的封閉液應降低非特異性結合，但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。

檢測試劑要適量
另一點也很顯而易見：切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會導致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時應加入終止液。

以上是上海勁馬何為您講解的關于ELISA試劑盒在實驗中背景過高的處理方法，如果您還有什么疑問可來電向我們咨詢，我們將一一為您解答。

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