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DNA改組(DNA shuffling)是目前zui方便、有效的一種分子水平的體外定向進化技術(shù),該技術(shù)同傾向錯誤PCR (Error-prone PCR) 相結(jié)合,通過對單基因或相關(guān)基因家族的靶序列進行多輪隨機誘變、重組和高通量的篩選,可以有效富集正突變,去除負突變,提高突變文庫的豐度,創(chuàng)造新基因和獲得期望功能的蛋白質(zhì)。來自湖南師范大學生命科學學院微生物分子生物學湖南省重點實驗室的研究人員對這一重要技術(shù)進行了總結(jié)和展望,并提出了DNA改組的創(chuàng)新,發(fā)展和改組過程中應當注意的問題。
DNA改組由由美國的Stemmer于1994年首先提出,經(jīng)后人的不斷創(chuàng)新和改進,現(xiàn)已發(fā)展成為比較完善的技術(shù)體系。作為一種高通量的突變和篩選技術(shù),不僅可以實現(xiàn)基因序列的點突變,還可以實現(xiàn)其它突變技術(shù)不能實現(xiàn)的基因片段插入、缺失、倒轉(zhuǎn)和整合等,而且可以反復改組,實現(xiàn)突變的優(yōu)勢積累效應。
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