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13817140470更新時(shí)間:2013-04-01 瀏覽次數(shù):1718
1971年瑞典學(xué)者Engvail和Perlmannn,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法,稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))。其基本原理與RIA相同。先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固相裁體上,并保持其免疫活性。測(cè)定時(shí),將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)。用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離成分。然后加入酶的作用底物催化顯色,進(jìn)行定性或定量測(cè)定。zui初發(fā)展的免疫酶測(cè)定方法。是使酶與抗體或抗原結(jié)合,用以檢查組織中相應(yīng)的抗原或抗體的存在。后來發(fā)展為將抗原或抗體吸附于固相載體,在載體上進(jìn)行免疫酶染色,底物顯色后用肉眼或分光光度計(jì)判定結(jié)果。這種技術(shù)就是目前應(yīng)用zui廣的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),俗稱ELISA (enzyme linked immunosorbant assay)。
*, 酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可導(dǎo)致大量的催化過程,所以極為敏感。免疫酶技術(shù)就是將抗原和抗體的免疫反應(yīng)和酶的催化反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種新技術(shù)。酶與抗體或抗原結(jié)合后,既不改變抗體成抗原的免疫學(xué)反應(yīng)的特異性,也不影響酶本身的酶學(xué)活性,即在相應(yīng)而合適的作用底物參與下,使基質(zhì)水解而呈色,或使供氫體由無色的還原型變?yōu)橛猩难趸?。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡相電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)加以測(cè)定。呈色反應(yīng)顯示了酶的存在,從而證明發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)。所以,這是一種特異而敏感的技術(shù),可以在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對(duì)其進(jìn)行定量。
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